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根据细胞在瓶、皿等容器中，是否能贴附在支持物上生长的特性，可分为贴附型和悬浮型两大类。活体体内的细胞离体后在体外培养大多数以贴壁的方式生长，主要包括一些正常细胞和肿瘤细胞，比如成纤维细胞，骨骼组织（骨及软骨），心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞，内分泌细胞，黑色素细胞及肿瘤细胞等。贴壁细胞在体外培养中，形态上表现单一化而失去体内原有的某些特征，多呈上皮样或成纤维细胞样。少数离体细胞在体外培养时则是悬浮生长，主要包括一些取自血、脾脏或骨髓等的细胞。

糖尿病（Diabetes mellitus）顾名思义，尿液中含有糖分，患病者容易出现消瘦和口渴症状，我国古代又称其为“消渴症”。是一种慢性、代谢性、非传染性疾病，主要表现为“三多一少”，即多饮、多尿、多食和体重下降，当胰腺胰岛素分泌不足或机体无法有效利用胰岛素时，机体就会出现糖尿病。长期糖尿病会导致心肌细胞的结构和功能改变，而这些改变与心肌缺血或微血管粥样硬化等疾病无关，这种心肌损伤被称为糖尿病性心肌病，是糖尿病的常见并发症，据估计，超过三分之一的糖尿病病患最终都会发展为糖尿病性心肌病。心肌细胞死亡是导致糖尿病心肌损伤的核心事件，然而病患心肌细胞死亡的具体机制在很大程度上却仍然未可知。

从生物体内取出组织或细胞，在体外(in vitro)模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，可使之保持一定的结构和功能，以便于我们观察研究，这种技术就是细胞培养（cell culture）。细胞培养有时也称为组织培养（tissue culture），二者可作为同义语使用。细胞培养的工作始于20世纪初，目前广泛应用于生物学、医学的各个领域，是各种细胞工程技术的重要基础。 根据细胞的来源我们可以将其分为原代细胞与细胞系，他们的获取与持续培养包括原代培养和传代培养，今天就来给大家介绍原代细胞与细胞系是怎样进行培养的。

阿尔茨海默病（Alzheimer's disease, AD）是一种慢性进行性神经系统疾病，常见于老年人，特别是65岁以上的人群。最初，阿尔茨海默病的症状可能是轻微的记忆问题，例如难以记住最近发生的事件或容易迷失。随着病情进展，患者的记忆和思维能力受到了严重影响，可能会忘记熟悉的人和事物，变得困惑和易怒，甚至可能失去自理能力。阿尔茨海默病的治疗难题在于我们尚未完全了解其发病机制。目前，普遍认为的机制是，β淀粉样蛋白的生成和清除失衡是导致神经元变性和痴呆的始动因素。异常水平的β淀粉样蛋白在大脑神经元之间形成斑块，产生神经毒性，导致神经元退化。研究阿尔茨海默病有助于我们深入了解该疾病的发生机制和诊断方法，进而提供更为有效的治疗方法和支持策略，从而提高患者的生活质量。

癌症基因组记录了正常细胞发育和癌变过程中 DNA 损伤和 DNA 修复缺陷引起的基因改变。BRCA1缺陷型（BRCA1d）和BRCA2缺陷型（BRCA2d）癌症的全基因组体细胞改变模式归因于HR的缺陷，HR是人类细胞修复双链断裂（DSB）的主要途径。其中一些突变模式可能反映了细胞在缺乏 HR 的情况下使用的特定易出错的 DSB 修复机制。这种突变模式可作为 HR 缺乏的生物标志物，并有助于识别临床相关的治疗缺陷。

RNA干扰（RNAi）是一种进化上保守的转录后基因调控机制，它是由双链RNA（dsRNA）诱发同源mRNA高效特异性降解从而抑制基因表达的现象，是研究基因功能常用的手段之一。用于诱导持续的RNAi的手段，是用pol III型启动子表达shRNA，常用的pol III型启动子有U6和H1，由于构建序列较短，shRNA能够轻易地插入病毒载体，但是要想实现特定组织中的基因沉默，几乎少不了组织特异性启动子的助力，然而U6和H1并不具有组织特异性，显然无法达到实验目的，有什么方法可以解决这个问题呢？答案就是利用miR30结构。本期小编将从基于miR30的shRNA、miR30结构的优势、案例分析三个方面为大家介绍用于组织特异性干扰的有力辅助工具—miR30结构。

据统计，每年有近1000万人受到酒精性肝病（ALD）的影响，其治疗费用每年超过1000亿美元，给社会带来了巨大的压力。ALD的发展一般是从单纯的肝脂肪变性到脂肪性肝炎，再到肝硬化，最终部分发展为肝癌。酒精性肝脂肪变性是ALD中最早的病理改变标志，在早期有效地预防肝脂肪变性的发生有助于阻止ALD的进展。目前对酒精性肝脂肪变性的发病机制已经做了大量的研究，但准确有效的早期预警和诊断方法仍有待探索。

自2012年“铁死亡”一词被Brent R.Stockwell 实验室正式命名以来，对它的研究在过去几年中一直呈现增长趋势。近10年，铁死亡相关的国自然项目数量一直呈现较大幅度的增长趋势，累计资助金额347691.63万。这些数据都足以说明铁死亡研究在不断受到科学家们的青睐，成为细胞死亡研究新的“团宠”。

Netrin-1是一种胚胎分泌型层粘蛋白相关糖蛋白，在神经元信息传递、血管生成和细胞存活中发挥着关键作用。Netrin-1主要在胚胎发育过程中表达，但在很大一部分人类肿瘤中，它被癌细胞和肿瘤微环境重新表达。特别是在炎症相关的结肠直肠癌、转移性乳腺癌、肺癌、神经母细胞瘤、淋巴瘤和黑色素瘤中，这种情况已经得到证实。在模拟这些疾病的临床前模型中，网织蛋白-1 及其受体之间的干扰足以引发癌细胞死亡并诱导肿瘤生长抑制。基于这些发现，一种能中和网织蛋白-1 并阻断网织蛋白-1-UNC5B 相互作用的单克隆抗体（mAb）被开发出来。

α-突触核蛋白病是一类神经退行性疾病的统称，包括帕金森病（PD）、路易体痴呆（DLB）、多系统萎缩（MSA）、阿尔茨海默病路易体变体（LBV-AD）和纯粹自主神经衰竭(PAF)等疾病,是一类神经退行性疾病；其特征是病理性α-突触核蛋白（α-synuclein, α-Syn）在受损的神经元中错误折叠和异常聚集，逐渐在神经元中形成不溶性α-Syn包涵体。

荧光素酶作为一种理想的报告基因，被广泛应用于转录因子结合位点与启动子活性分析、RNA降解、信号转导、药物筛选、动物活体成像等领域。前两期为大家介绍了荧光素酶的发展和原理以及在miRNA与靶基因结合方面的应用。本期就来详细聊聊双荧光素酶在转录因子与启动子互作验证方面的应用。

上期为大家介绍了萤光素酶的发展和原理。萤光素酶作为一种理想的报告基因，常用于研究miRNA与靶基因的靶向互作、转录因子和启动子调控机制等。本期就来详细聊聊双萤光素酶在miRNA与靶基因靶向互作方面的应用。

同样是做慢病毒感染，为什么我的感染效率和别人的感染效率差那么多？就让小恒来告诉你，怎么提高慢病毒感染效率吧~

在上一系列的干货分享中，我们介绍了组织（细胞）特异性基因表达调控相关知识。接下来，我们将目光聚焦 “检测工具的核心成员”——荧光素酶，开启一个新的篇章。本系列将由荧光素酶的历史和发展开始，详细介绍当前荧光素酶相关实验的干货知识。

提到“视黄醛（A醛）”，首先会想到什么？当然是抗老！！！A酸、A醇、A醛、玻色因......，但是，“视黄醛”另一个作用却鲜为人知，视黄醛缺乏——糖尿病恶化。 视黄醛（Rald，A醛）是视黄醇转化为视黄酸（RA，A酸）过程的中间物，属于维生素A类物质，是机体维持正常生理过程的必需营养素。近年来，越来越多研究发现Rald可以影响机体糖脂代谢平衡，此过程主要由葡萄糖激酶（GCK）、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1（PCK1）和葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）等酶控制。中国药科大学刘晓东团队前期研究中发现Rald浓度稳定对维持机体糖稳态具有重要作用，且2型糖尿病（T2D）患者体内常常伴有Rald水平降低现象，但Rald缺乏在T2D中作用的具体机制却尚不清晰。

2023年6月6日，哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科金世柱教授团队在国际知名权威杂志《Advanced Science》 (Q1，IF=17.521) 发表题为“From Phenomenon to Essence: A Newly Involved lncRNA Kcnq1ot1 Protective Mechanism of Bone Marrow Mesenchymal Stromal Cells in Liver Cirrhosis”的原创性研究论文。该研究发现了骨髓间充质干细胞通过下调lncRNA Kcnq1ot1抑制肝星状细胞的活化，同时通过调控 Creb3l1/lncRNA Kcnq1ot1/miR-374-3p/Fstl1抑制肝硬化发展的重要机制，为未来开发骨髓间充质干细胞治疗肝硬化的方案提供了重要线索。文中使用了来自汉恒生物的腺相关病毒AAV9及肝实质细胞特异性启动子TBG，对肝脏中lncRNA Kcnq1ot1进行了特异性敲低，推动了相关实验研究进展。

作为泌尿系统中最重要的器官，肾脏在血液循环系统中承担着滤过排出代谢物并重吸收水和营养物质的重要责任。肾脏也具有内分泌功能，可生成肾素、促红细胞生成素、激肽等。肾单位是组成肾脏的结构和功能的基本单位，包括肾小体和肾小管。肾小体内有一个肾小球，它由肾动脉分支形成。肾小球外有肾小囊包绕。肾小囊分两层，两层之间有囊腔与肾小管的管腔相通。肾小管汇成集合管，若干集合管汇合成乳头管，尿液由此流入肾小盏。 肾脏中有20多种不同的细胞类型，肾小体的主要细胞包括由构成球内毛细血管的内皮细胞、构成肾小囊的上皮细胞、囊壁反折包裹毛细血管形成的足细胞、及连接毛细血管的球内系膜细胞等；肾小管主要由肾小管上皮细胞构成。多种细胞类型和复杂的结构是阻碍肾脏基因治疗的阻碍，因此，有效的基因传导是该器官分子治疗成功的关键。 AAV作为基因递送的重要载体之一，具有高安全性和物种兼容性。针对不同组织和不同细胞选择合适的血清型、特异性启动子和注射方式有效提高AAV的感染效率，接下来，小编将和大家一起学习AAV在肾脏疾病研究中的靶向递送策略

芳香烃受体（Aryl hydrocarbon receptor，AhR）是一种由配体激活的转录因子和核受体。AhR可通过多种途径调节病毒的感染和复制，从而为许多病毒提供了生存优势。有研究报道，感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2 （SARS-CoV-2）后，AhR被激活以促进病毒复制，表明在SARS-CoV-2感染期间AhR调节可能具有新的治疗作用。然而AhR是否在SARS-CoV-2复制中作为原宿主因子发挥作用，以及AhR是否可成为针对SARS-CoV-2及其变体的广谱抗病毒治疗靶标尚有待深入研究。

神经组织的细胞类型大体分为两类：神经元细胞和神经胶质细胞；神经元细胞是构成神经系统结构和功能的基本单位，神经胶质细胞包括分布在中枢神经系统中的星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞，以及分布在周围神经系统中的施万细胞和位于脊神经节内的卫星细胞等。

非酒精性脂肪肝炎（NASH）是发展为肝硬化和肝癌的主要原因，其病理特征是肝脂肪性病变、肝细胞气球样变、肝小叶和肝脏炎症以及间质纤维化。目前，预防和治疗NASH的有效措施仍然有限，还没有相应的治疗药物，因此寻找NASH的分子靶点也越来越受到重视。近年来，许多研究证明溶酶体调节着许多疾病的发生发展。其中溶酶体相关跨膜蛋白5（LAPTM5）是LAPTM家族成员之一，可作为一些疾病的干预靶点，例如通过调节MAPK信号通路的活性来改善心肌肥大。此外，MAPK信号通路的激活与NASH发生发展有着密切的关系。因此，作者综合已有研究提出假设，即LAPTM5参与调控NASH的发生发展。