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腺相关病毒,你知道多少?

人阅读 发布时间:2018-05-05 15:31

腺相关病毒(AAV)简介

 

腺相关病毒属微小病毒科( parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV 的基因组约 4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由 145 个核苷酸组成的 2 个反向末端重复序列(ITR)之间。

基因组中有 3 个启动子(P5、P19 和 P40) 和 2 个开放阅读读框(ORF),rep 和 cap,如图 1 所示。rep 编码 4 个重叠的多功能蛋白,即 Rep78、Rep68、Rep52 和 Rep40,其中 Rep78 与 Rep68 参与 AAV 的复制与整合,Rep52 和 Rep40 具有解螺旋酶和 ATP 酶活性,与 Rep78、Rep68 共同参与单链基因组的复制;cap 编码的 VP1、VP2、VP3是装配成完整病毒所需要的衣壳蛋白,它们在 AAV 病毒整合、复制和装配中其重要作用。

图:AAV 基因结构

 

2腺相关病毒的优点

 

1. 安全性高:迄今从未发现野生型 AAV 对人体致病,重组 AAV 基因组序列上去除了大部分的野生型 AAV 基因组元件,进一步保证了安全性;

2. 免疫原性低:AAV2 的基因组仅 4681 个核苷酸,便于用常规的重组 DNA技术进行操作,而且进行动物实验时造成的免疫反应小;

3. 宿主范围广:能感染分裂细胞和非分裂细胞;

4. 表达稳定:能介导基因的长期稳定表达;

5. 物理性质稳定:在 60℃不能被灭活,能抗氯仿;

 

3重组腺相关病毒载体不同血清型

 

研究发现 AAV 具有多种血清型,各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是 衣壳蛋白不同,因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前汉恒生物 在包装腺相关病毒时有 9 中不同的 AAV 血清型可供客户选择,建议客户针对不同 组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒,见下表。

 

9种不同血清型对各组织器官细胞的亲和性

血清型 组织亲和性

AAV1 肌肉,心脏,骨骼肌(包括心肌),神经组织

AAV2 中枢神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼,

AAV3 肌肉,肝脏,肺,眼

AAV4 中枢神经,肌肉,眼,脑

AAV5 肺,眼,中枢神经,关节滑膜,胰腺

AAV6 肺,心脏

AAV7 肌肉,肝脏

AAV8 肝脏,眼,中枢神经,肌肉

AAV9 心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,中枢神经

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