简介 

 

心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)又称循环系统疾病，主要包括心脏病和心脏的血管病两大类，其中临床表现为高血压、心绞痛、冠心病、心律失常和急性心肌梗死等。

 

其中心脏病主要表现为缺血性心脏病(ischemic heart disease, IHD)，即由冠状动脉狭窄、供血不足所引发的心肌机能障碍和/或器质性病变，又称冠状动脉性心脏病。

 

缺血性心脏病常引起心律失常、心力衰竭、心源性休克等继发症，是造成心源性猝死的罪魁祸首。

 

临床上处理缺血性心肌损伤的原则是尽早恢复心肌血液供应——再灌（Reperfusion），如药物溶栓、介入治疗和手术搭桥等，使缺血心肌组织重新得到血液和氧的供应。
 

 

 

如何进行心肌疾病相关的基因功能研究呢？包括了选择什么样的疾病模型、以及心肌基因转导工具的选择。

 

汉恒心肌学术团队把心肌疾病机理与防护/治疗相关的研究model做了一下分类：

 

 

 

 

 

 

病毒载体在心肌基因转导中的应用

 

在心肌方面，早期用多腺病毒进行体内体外的基因转导，慢病毒的应用相对较少，基本只用于H9C2细胞的转导，但近几年心肌体内转导越来越多地应用AAV载体。

 

 

 

汉恒总结了大量的文章数据和汉恒研发中心数据，对不同的心肌给出评分及推荐（见下表，红色为推荐方法）

 

 

 

 

慢病毒滴度较低，较少用于动物活体实验。腺病毒免疫原性高，必须原位注射，且分子较大，会被体内防御系统识别进而清楚，表达周期仅2-3周。

 

所以AAV（腺相关病毒）则是心肌体内基因转导最优方式。

 

AAV颗粒小，易于扩散，免疫原性低安全性高，能在体内持续表达3-6个月。AAV9是公认的高效特异性靶向心脏表达的病毒载体血清型。

 

 

图 不同血清型AAV感染小鼠心脏组织。cTnT-EGFP包装进AAV衣壳血清型2,1,6,8,9后分别通过颈静脉注射1周龄小鼠，4周后检测小鼠心脏组织EGFP荧光 （Gene Therapy. January，2011）

 

汉恒心肌特异性AAV，通过AAV9，优选心肌特异性启动子cTNT和其他分子元件，实现心肌的高效基因转导。心脏中起始cTNT正常转录的元件较多，因此在心脏中相对表达量较其他部位高出很多。这里的表达是相对的，也就是说其他部位也可能会表达目的基因，但是跟心脏的表达量相比，可以忽略不计。

 

图. 心肌特异性启动子表达效果图。小动物活体成像表明cTNT主要介导基因在心脏表达，虽然在肝脏中有些微渗漏。

 

汉恒生物心肌特异性AAV：AAV-heart 

 

 

汉恒生物研发团队，对普通AAV9进行了改造，研发出了心肌特异性AAV：AAV-heart，只需尾静脉注射即可，无需原位开胸，相对于普通AAV9特异性更强、感染效率更高。

 

 

心肌基因功能研究利器——汉恒【AAV-heart】C位出道