慢病毒包装完成后如何用慢病毒感染目的细胞

 

实验准备：将状态良好的细胞接种到6孔板

 

实验步骤：1、从培养箱中取出接种细胞的6孔板，吸去原有培养基，加入新鲜培养基和Polybrene（如有需要），混匀后放入培养箱，37℃孵育30min

          2、30min后，取出，同时从冰箱中取出慢病毒，缓慢冰融

          3、将病毒液按不同MOI加入细胞中，混匀，37℃培养12h

          4、12h后吸去含病毒的培养液，换上新鲜培养液，37℃培养48h

          5、带GFP的病毒，通过荧光显微镜观察表达效率；

               带Puromycin的病毒，换上适当浓度的Puromycin的新鲜培养液筛选稳定转导的细胞株