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一张图概括自噬研究

人阅读 发布时间:2019-12-06 10:14

自噬是细胞在自噬相关基因(autophagy related gene,Atg)的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。对实现细胞代谢需要、更新某些细胞器并维持细胞内稳态有较重要的作用。
 

近几年,自噬研究的热度不减,国自然相关研究的中标数量也呈增长趋势,在 2016 年,自噬相关研究被授予了诺贝尔生理医学奖。
 

自噬国自然中标趋势

自噬是一种非常基础的生命活动现象,它可能参与生命活动的方方面面,比如肿瘤、炎症、免疫应答、氧化应激等。通常情况下,除了研究自噬现象本身,大家更多的是将自噬与各种生命活动或者疾病结合起来,把自噬作为这些方向的一个机制来研究。

比如研究自噬如何参与肿瘤的发生发展、如何参与肿瘤的耐药性与复发转移、如何参与肿瘤免疫治疗的效果、自噬如何参与炎症反应、自噬如何参与氧化应激,甚至自噬如何参与自闭症、阿兹海默症的发生与治疗等。汉恒生物也为大家整理了基础的自噬研究模式:

 

 
在 2017 年 7 月汉恒客户发表的 Cell 论文中(文章名:Fusobacterium nucleatum Promotes Chemoresistance to Colorectal Cancer by Modulating Autophagy),也是运用了这一思路。

I-自噬参与表型-汉恒自噬黄金标准(后文详解)
 


II-自噬在表型中起了关键作用-CQ(氯喹)抑制自噬看表型
 



 
III-自噬通路关键基因变化导致表型
 

自噬关键基因的人为干预
 

自噬关键基因变化的分子机制以及跟对应表型的关系

自噬表型研究中,汉恒生物一直倡导「自噬研究的金指标」----包括 LC3 剪切的变化、电镜直接观察到自噬囊泡、荧光蛋白标记的 LC3 监测自噬流。

 
         图 A                                               图 B                                 图 C

衡量自噬的三个「黄金标准」,分别是 LC3 的翻译后加工及脂化修饰(图 A)、利用电镜直接观察自噬小体和自噬溶酶体的多少(图 B)、荧光蛋白标记的 LC3 监测自噬流(图 C)。

荧光蛋白标记的 LC3 监测自噬流,即用汉恒的 mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的腺病毒,感染细胞。mRFP 用于标记及追踪 LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于 GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后 GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。

就像这样:

 

汉恒生物为大家详细整理了:自噬研究手册
PART1自噬的概念及自噬切入角度
PART2自噬的「黄金标准」 及调控自噬流的方法
PART3自噬领域的金牌研究工具
PART4基因的操作在自噬研究过程的作用
PART5其他细胞器的自噬研究和自噬流荧光数据的处理

汉恒生物科技(上海)有限公司提供慢病毒载体构建、RNAi(shRNA)、miRNA、过表达和干扰慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务。

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